摘要:目的研究CD34在乳腺癌中的表达,探讨它们的表达与乳腺癌浸润、转移的关系及临床意义。方法应用免疫组织化学法检测乳腺癌患者癌组织、癌旁2cm乳腺组织及距癌组织5cm以上的正常乳腺组织中CD34的表达,测定乳腺癌组织中CD34标记的微血管密度(microvesseldensity,MVD)。结果60例乳腺癌组织中MVD值为54.60±10.54,60例癌旁组织MVD值为33.05±7.70,60例正常组织MVD值为25.40±5.71。组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论CD34在乳腺癌中的表达均增高,明显高于癌旁组织及正常乳腺组织。表达与乳腺癌肿瘤大小、组织学分级、临床分期、淋巴结转移密切相关。关键词乳腺癌;CD34;微血管密度;免疫组化;StudyoftherelationsbetweentheexpressionlevelofCD34andtheinfiltration、metastasisofbreastcancer.AbstractObjective:TostudytheexpressionofCD34inpatientswithbreastcancers,andinvestigatetherelationsbetweentheirexpressionandtumorinfiltration、metastasisandclinicalsignificance.Method:MorphologicalandpathologicalalterationsweredetectedbyusingHEstaining.CD34weremeasuredbyimmunohistochemicalmethodinthebreastcancertissues、theparatissues2cmfromthemarginofbreastcancertissuesandtheparatissues5cmfromthemarginofbreastcancertissues.microvesseldensity(MVD)weremarkeredbyCD34inbreastcancertissuesweremeasured.Results:MVDvaluein60casesofbreastcancertissueswas54.60±10.54,in60casesofparatissueswas33.05±7.70,in60casesofnormaltissueswas25.40±5.71.Thereweresignificancesamonggroups(P<0.01).Conclusion:CD34up-regulatedinthebreastcancertissues.Theexpressionlevelinthecancertissueswassignificantlyhigherthanthatintheparacancertissuesandinthenormaltissues.KeywordsBreastcancer;CD34;Mcirovesseldensity;Immunohistochemistry在全世界范围内,乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤[1]之一,且其发病率也在逐年上升,己成为威胁妇女健康的主要疾病。近年来在我国,特别是在一些大城市及经济发展较快的沿海地区,乳腺癌的发病率不断上升,而且有年轻化的趋势[2,3]。乳腺癌的浸润和转移是影响患者生存质量和生存时间的重要因素。相关研究提示乳腺癌的淋巴结转移或血行转移与否是对乳腺癌的临床预后评估的重要指标。本研究主要是通过检测乳腺癌组织标本中CD34的表达水平探讨CD34表达与乳腺癌浸润转移的关系,为乳腺癌浸润转移的预防和临床治疗提供一定的理论依据。1材料和方法1.1标本来源收集2010年3月至2012年6月驻马店市第一人民医院普外科手术切除的原发性乳腺癌病理标本60例。所有患者均为女性,年龄32~73岁,中位年龄47岁。所有患者术前均未行任何化疗、放疗和内分泌治疗;均行乳腺癌改良根治术;其中浸润性导管癌46例,浸润性小叶癌14例,经病理确诊均为浸润型乳腺癌。其中伴淋巴结转移者占32例。取癌组织、癌旁2cm的乳腺组织及距癌组织5cm以上的乳腺组织各一块,用10%中性甲醛固定,生物自动脱水机处理后制成蜡块备用。1.2主要实验仪器及试剂CD34单克隆抗体及超敏(鼠)S-P试剂盒,DAB显色剂(福建迈新生物技术有限公司)。1.3S-P免疫组化染色操作步骤从略。其中鼠抗人CD34单克隆抗体采用高温高压进行抗原修复。每次试验以PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照,并以已知CD34阳性的切片作为阳性对照。1.4免疫组化结果判断MVD计数标准:参照Weidner等报道的方法,以与背景明显有区别的任何一个棕色染色内皮细胞或细胞丛计数为一个血管,只要结构不相连续,分支结构也可计数为一个血管。首先在100倍光镜下寻找肿瘤组织中血管密度最高的10个区域;然后在200倍光镜下计数微血管数目,10个区域的均值为该肿瘤组织样本的MVD值。分辨不清或染色模糊的细胞不记入计数结果。凡管腔大于8个红细胞直径且带有较厚肌层和硬化区的血管也不记入结果。1.5统计学分析采用SPSS13.0统计分析软件,数据均以±s表示,计数资料比较使用χ2检验,计量资料采用t检验和单因素方差分析,采用Spearman法进行相关分析。显著性检验水平α=0.05。2结果CD34阳性表达位于乳腺癌组织间质血管内皮细胞胞浆;微血管在间质和癌巢内均有分布,但主要分布在间质区域内,其形态与大小不均匀,可表现为单个内皮细胞着色、内皮细胞簇着色或相互连接形成管腔的内皮细胞着色。乳腺癌癌组织中微血管在癌巢周边的间质中分布比较密集,而在肿瘤细胞团块中的分布相对较少;乳腺癌癌旁组织及正常乳腺组织中微血管间质分布明显较少。60例乳腺癌组织中MVD值为54.60±10.54,60例乳腺癌癌旁组织MVD值为33.05±7.70,60例癌周正常组织MVD值为25.40±5.71,组间比较有显著性差异(P<0.01)。结果见表3。表3.乳腺癌癌组织、癌旁组织及乳腺正常组织MVD值的比较组别 例数 MVD值(±s)乳腺正常组织 6025.40±5.71乳腺癌癌组织 60 54.60±10.54★癌旁组织 6033.05±7.70★△注:★P<0.01,与正常组织比较;△P<0.01,与乳腺癌癌组织比较3讨论CD34的表达与乳腺癌微血管生成的关系肿瘤的侵袭、转移和生长依赖于新生血管生成(angiogenesis)。肿瘤细胞不仅可以通过新生血管获得生长所必须的营养成分和氧气,而且还可通过新生血管转移到继发部位,并在继发部位形成新的肿瘤病灶。近年来的研究发现,CD34的表达与肿瘤的发生、发展、浸润和转移也有密切关系[4]。相关研究表明,CD34在许多恶性肿瘤中表达均呈上调趋势。CD34可促进肿瘤血管内皮细胞增殖和恶性肿瘤生长的相关蛋白之间的相互作用而增进恶性肿瘤的浸润和转移。目前,在血管生成方面的研究中,评价恶性肿瘤血管生成程度的较客观标准是肿瘤组织内的微血管密度;肿瘤组织中微血管数量越多,肿瘤细胞进入血液循环的机会就愈大,就越能够增加肿瘤的发生和转移的可能。而且有学者通过大量的临床检测发现肿瘤组织中的微血管密度比肿瘤周围正常组织明显增高[5]。Sharma等[6]指出研究实体肿瘤组织中的微血管密度最大的价值是,在于预测实体肿瘤的侵袭与转移,并且还与肿瘤的各种预后因素有关,是预测肿瘤是否有全身转移和局部复发以及无病生存的一个显著因子。本实验应用CD34抗体和免疫组化的方法研究乳腺癌肿瘤组织中的MVD的表达状况。结果显示,乳腺癌癌组织MVD值明显高于乳腺正常组织及癌旁组织,差异有显著性(p<0.01)。该结果说明CD34的表达水平与肿瘤血管生成具有一定的相关性。
下肢静脉曲张(LVV)是指下肢浅静脉系统处于伸长、蜿蜒及迂曲状态,通常发生在大隐静脉属支,在我国发病率较高。单纯性大隐静脉曲张是指隐股静脉瓣膜功能不全引起的浅表静脉曲是最常见的周围血管病。近年来虽出现了一些如激光、电凝等微创手术,但对于曲张的小腿部小静脉、静脉蜿蜒成团及合并浅静脉血栓的尚无有效办法。透光旋切术是采用Irivex对曲张浅静脉的微创手术。该方法能彻底清除所有的曲张静脉和浅静脉血栓,对浅静脉团及皮下连的浅静脉均可一次性切除。驻马店市第一人民医院普外二科在科主任王学军的带领下,积极开展下肢浅表血管透光旋切术,并迅速发展。TriVex旋切去除术作为唯一的旋切治疗下肢静脉曲张的术式,近年来得到了众多专家学者的认可。经我们研究证实TriVex微创治疗在临床实践中具有明显优势。我们认为:该方法操作简单、创伤微小、效果好且美观、安全性好、术后康复快、患者满意度高。特别对其他方法久治不愈的病人带来了新的治愈希望。该技术的开展为下肢静脉曲张开辟了新的途径。 作为唯一的旋切治疗下肢静脉曲张的术式,近年来得到了众多专家学者的认可。经我们研究证实TriVex微创治疗在临床实践中具有明显优势。我们认为:该方法操作简单、创伤微小、效果好且美观、安全性好、术后康复快、患者满意度高。特别对其他方法久治不愈的病人带来了新的治愈希望。该技术的开展为下肢静脉曲张开辟了新的途径。