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李铮主任医师 上海市第一人民医院(北部) 男科 原创 陈威李朋白昊威 前言2022年2月6日,上海交通大学附属第一人民医院李铮和吴煜/张箴波团队在著名男性生殖杂志“AsianJournalofAndrology“”在线发表题为“ClinicalbenefitsofamodifiedCryopiecesystemforcryopreservationofrareejaculatedandtesticularspermatoz-oaforICSI(改良超薄片冻融稀少精液或睾丸精子的临床获益)”的文章。这是自2016年成功孕育国内第一例通过单精子冷冻技术诞生的试管婴儿,结合团队多年临床治疗经验,总结和优化单精子冷冻系统后,系统分析和报道优化单精子冷冻系统所出生12名单精子冷冻试管宝宝的故事。这对于上海市第一人民医院男科和辅助生殖科来说又一个跨越性的进步,进一步证实单精子冷冻技术是解决极少量精子患者生育问题非常有效且安全的核心技术手段。李铮与吴煜/张箴波团队就此与读者分享,以期为更多严重男性不育患者获益,共同推动男性生育力保存的临床应用。01 文章基本概述稀少与单精子冷冻系统(modifiedCryopiecesystemforcryopreservationofrareejaculatedandtesticularspermatozoa)上海市第一人民医院泌尿外科临床医学中心男科主任李铮教授介绍,无精子症是男性不育的疑难重症,约占男性总人口的1%,占男性不育人口10%-15%,推算我国无精子症患病人数已达到500万-600万左右。如此人数众多的患者群体,在过去,由于缺乏有效的治疗方法,患者几乎无法生育自己的生物学子代。而如今,可以通过药物新辅助治疗出现精子、或通过显微取精技术取到精子,继而实施辅助生殖技术成功生育子代。通过药物治疗或者睾丸手术取精获得的极少量的精子,如何将其受精和发育功能完整的保存下来,目前是男性生育力保存的一个亟需解决的难题。文章介绍的单精子冷冻系统,为解决这个难题,提供了一个全新的解决思路并在临床应用中进一步的验证了临床应用的可行性及安全性。所谓单精子冷冻技术,是指将严重少精子症或无精子症男性患者,经过治疗或手术后取得的极少量的精子逐个挑选出来,加载在特殊的载体上,放入-196℃液氮进行保存的技术(发明专利号:ZL201610396509.1)。通过新载体Cropiece(专利号:ZL201620544372.5)实施此项技术,以成功实现患者夫妇拥有健康宝宝的梦想。首先通过直接洗涤或者梯度离心等方法,将精液中或者分离于生精小管中的极少量的精子分离和浓缩在少量液体中。然后将这少量的标本在特制的平板中平铺开,让精子获得运动能力,游动起来。技术人员在显微镜下,通过显微镜放大作用将液体中极少量的精子找出(通常情况下0-30条精子),同时判断精子的活力、形态。然后通过显微注射针(直径5-7μm)抓取后,放置于Cryo-piece片(冷冻载体)上的特制的冷冻保护剂的冷冻液滴中(1-2μl)。在规定的时间内,将带有抓取好精子的冷冻载体,按照特定的冷冻程序进行降温,最后冷冻在-196℃液氮中。通过改良单精子冷冻系统,可以将极少量的精子,通过“单个抓取小室”冷冻的方法保存起来,可以极大程度上避免传统冷冻方法冷冻极少量精子过程中精子丢失和精子活力丢失的问题。从文章中获悉,从2016年第一例单精子冷冻试管婴儿出生,到2019年又有12名单精子冷冻试管宝宝陆续出生。后续还有近百位患者进行进一步ICSI治疗,目前复苏后精子回收率能够稳定在80%,存活率近30%,这对于严重男性不育者而言,这是临床创新技术,是生育自己子代的福音。同时文章报道,该技术运用到睾丸显微取精手术中获得同样的效果,虽然精子的复苏率不如手淫获取的精液精子,但是受精率、怀孕率和出生率均与手淫获取的精子没有差异。进一步证实,单精子冷冻技术同样适用于冷冻睾丸手术取精患者的极少量精子的冷冻,并且能够获得同样的成功率。文章进一步报道:对于一些获得极少量精子但是复苏后没有活力的病例,也进行相应处理。在征得患者的同意并签署知情同意书的情况下,通过卵母细胞辅助激活的方法来解决单精子冷冻过程中,复苏后精子的受精低下问题。文章中提到,通过卵子激活后的单精子冷冻系统的复苏精子的受精率有大幅的提高。但是辅助激活组的的流产率也有所提升。同时文章中也提到,对于复苏后无活力精子进行卵母细胞的辅助激活,虽然在受精率上有所提升,但是如何进一步提高妊娠率,需要加大样本量深入研究。目前极稀少精子的单精子冷冻系统,在上海市第一人民医院李铮和吴煜/张箴波团队的指导下,经过进一步研究、完善和改良后取得了更好的临床效果。目前已采用此法已经为国内外近百名患者进行了单精子冷冻,该类患者通过冷冻好的这些极少量的精子获得了进行辅助生殖技术得到生育自己孩子的机会。除了文章中提到的12名出生的单精子宝宝出生,还有一批怀孕中的单精子宝宝,中心会一直关注这些孩子的健康成长,期待更多患者的好消息。男性生育力保存任重而道远,我们一起上下求索。愿天下家庭俱欢颜!02 研究团队【第一作者介绍】上海市交通大学附属第一人民医院辅助生殖医学科。研究方向主要关注人类配子、卵巢及睾丸组织相关的生育力保存研究。DPV单精子冷冻和umSSC超微量单精子冷冻技术发明者,并成功出生国内第一例单精子冷冻技术试管婴儿。目前以第一或通讯作者发表SCI论文6篇,获得国家发明专利1项,实用新型专利1项。上海市交通大学附属第一人民医院男科博士后,中国妇幼保健协会辅助生殖技术监测与评估专业委员会精子库与生殖男科学组委员兼秘书,中华预防医学会生育力保护青委会委员,吴阶平医学基金会生殖青年专委会委员,湖南省免疫学会生殖免疫分会青年委员,湖南省医学会生殖医学专委会生殖男科学组委员,湖南省医学会男科学专业委员会男性不育与生殖学组秘书。研究方向:男性生育力保存,目前主持国家级课题2项。以第一作者发表SCI论文16篇,以第一完成人获得专利7项。【通讯作者介绍】上海交通大学附属第一人民医院主任医师、教授、博导,泌尿中心副主任、男科主任、辅助生殖科副主任。先后作为高级访问学者留学美国、加拿大与与香港地区。现任中国医师协会男科与性医学分会常委兼总干事,上海医学会男科学分会前任主任委员,中国医师协会生殖医学专业委员会常委兼男科学副组长,亚洲男科学协会常委兼秘书长,上海医师协会生殖医师分会副会长,国家卫健委辅助生殖技术评审专家。担任国内外男性生殖领域重要期刊10本杂志编委或特邀编辑。聚焦精子发生机制与干细胞向精子诱导分化,国际上首次实现从患者睾丸中获取精原干细胞,体外诱导分化为精子细胞,并具有受精潜能。国际上首次证明单精子冻融可安全用于临床,并出生健康子代。目前承担国家重大课题子课题一项;自然基金面上项目二项。作为第一完成人,荣获教育部科技进步二等奖,上海医学科技一等奖,亚洲男科学协会“杰出学术贡献奖”,上海医学会“领军人物奖”,上海交通大学医学院“卓越教师奖”。上海交通大学附属第一人民医院生殖医学科,主任医师。上海医学会生殖医学专科分会副主任委员。上海市中西医结合学会第二届生殖医学专业委员会副主任委员。中国女医师学会生殖医学专业会常委。上海医师协会生殖生殖医学医师分会委员。研究专业方向:不孕不育,辅助生殖技术。2022年05月07日 667 0 2
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