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尖锐湿疣

尖锐湿疣应该做哪些检查

发表者:刘厚君 43447人已读

醋酸白试验

3-5%醋酸外涂疣体2-5分钟病灶部位变白稍隆起肛门病损可能需要15分钟本试验的原理是蛋白质与酸凝固变白的结果HPV感染细胞产生的角蛋白与正常的未感染上皮细胞产生的不同只有前者才能被醋酸脱色醋酸白试验检测HPV的敏感性很高它比常规检测观察组织学变化还好但偶尔在上皮增厚或外伤擦破病例中出现假阳性假阳性变白迹象显得界限不清和不规则美国CDC提示醋酸白试验并不是特异试验且假阳性较常见华中科技大学同济医学院附属协和医院皮肤性病科刘厚君

免疫组织学检查

常用过氧化物酶抗过氧化物酶方法(即PAP)显示湿疣内的病毒蛋白以证明疣损害中有病毒抗原HPV蛋白阳性时尖锐湿疣的浅表上皮细胞内可出现淡红色的弱阳性反应

组织化学检查

取少量病损组织制成涂片用特异抗人类乳头瘤病毒的抗体作染色如病损中有病毒抗原则抗原抗体结合在过氧化物酶抗过氧化物酶(PAP)方法中核可被染成红色此法特异性强且较迅速对诊断有帮助

病理检查

主要为角化不全棘层高度肥厚乳头瘤样增生表皮突增厚延长其增生程度可似假性上皮瘤样刺细胞和基底细胞并有相当数量的核分裂颇似癌变但细胞排列规则且增生上皮和真皮之间界限清楚其特点为粒层和刺层上部细胞有明显的空泡形成此种空泡细胞较正常大胞浆着色淡中央有大而圆深嗜碱性的核通常真皮水肿毛细血管扩张以及周围较致密的慢性炎性浸润Bushke-loewenstein巨大型尖锐湿疣表皮极度向下生长代替了其下面的组织易与鳞状细胞相混故须多次活检若有缓慢发展之倾向则为种低度恶变的过程即所谓疣状癌

基因诊断

迄今HPV难于用传统的病毒培养及血清学技术检测主要实验诊断技术是核酸杂交近年来发展的PCR方法具有特异敏感简便快速等优点为HPV检测开辟了新途径

()标本的采集及处理

1.标本的采集和预处理:用刮板或生理盐水浸润的棉棒从阴道和宫颈外口取分泌物和细胞在作细胞学检查的同时将标本放入5ml含有0.05%硫柳汞的PBS中用PBS离心(3000g10min)洗涤2次沉积细胞重悬于1mlPBS中取0.5ml细胞悬液抽提DNA

2.标本核酸的提取:按1体积细胞悬液加10倍体积的细胞裂解液(10mmol/L Tris-HClpH 7.410mmol/L EDTA150mmol/L NaCl0.4%SDS1.0mg/ml蛋白酶K)37℃下处理过夜;且等体积酚/氯仿(1:1)氯仿/异戊醇(24:1)各抽提2次加1/10体积3mol/L NaAc(pH 5.2)及2.5倍体积无水乙醇置-20℃2h或过夜沉淀DNA加1体积乙醇洗涤1次用60μl含RNA酶(100μg/ml)的TE液(10mmol/L Tris-HClpH 8.01.0mmol/L EDTA)溶解DNA37℃温育30min

()PCR扩增

1.引物设计和合成:HPV基因组可分为早期区(E)和晚期区(L)每区含系列开放读码框架(ORF)序列分析表明各型HPV的非编码区及E1E6E7和L1区均有保守序列Manos等从HPVL1区中选择保守序列设计合成引物MY11和MY09见表1该引物与HPV 6111618及33型有互补序列也可扩增其它型HPV

Manos等设计的HPVL1通用引物

MY11:GCMCAGGGWCATAAYAATGG

MY09:CGTCCMARRGGAWACTGATC

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发表于:2009-04-11 02:02

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