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严重过敏不容忽视的过敏原——坚果与花椒

发表者:李宏 人已读

花椒严重过敏反应及花椒致敏组分分析△
李 宏 ,程 璇,尹 佳,王瑞琦,张宏誉
(中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院变态反应科,北京100730)
· 临床研究·
摘要:目的 总结15例花椒严重过敏反应患者的临床特点、点刺试验、特异性IgE结果,并对花椒致敏组分进行分析。方法采用统一问卷,收集所有花椒过敏反应患者的临床资料。用ImmunoCAP检测血清花椒籽和花椒皮特异性IgE。用Powerlook21O0XL fUMAX1扫描和imageQuant TL软件分析花椒籽和花椒皮的SDS.PAGE蛋白电泳成分和免疫印迹结果。结果 花椒过敏15例,男6例、女9例,就诊年龄28—59岁,均表现为速发型食物过敏反应,过敏反应均发生于进食过敏食物后30分钟内;14例诊断为严重过敏反应,其中5例曾发生过敏性休克(2例伴有意识丧失),1例诊断为急性荨麻疹。14例起始症状为13咽部过敏反应。该组病例均伴有多种食物,如腰果、开心果、橘子、金桔、芝麻、杏仁、榛子、松子、芒果等过敏;15例均存在腰果和/或开心果过敏,但进食花生、黄豆均不过敏。食物过敏病程1一l7年不等。10例过敏患者花椒籽点刺试验均为强阳性,2例为3+、8例为4+,2例出现全身反应,24小时内好转;花椒皮点刺试验l例为2+,2例为+,7例为一。3例健康对照者花椒皮和花椒籽点刺试验均为阴性。13例花椒过敏患者中,花椒籽特异性IgE,1例为2级,余12例均为3级以上;花椒皮特异性IgE,11例为0级,2例为2级。花椒籽与花椒皮特异性IgE比较,差异有显著性意义(P<0.00014)。花椒籽和花椒皮致敏组分蛋白免疫印记结果显示,7例患者中1例相对分子质量为11 400~12 400,3例为l1 400,1例为l1 300,1例为l1 400 12 500,1例无结合条带。结论进食少量花椒即可能诱发严重的过敏反应,甚至过敏性休克。花椒过反应是由IgE介导的速发型食物过敏反应,部分患者可表现为速发相和迟发相双相反应。花椒变应原来自花椒籽,而不是花椒皮。对花椒高度敏感个体,花椒点刺试验有可能诱发全身过敏反应。目前检测到的花椒籽变应原致敏组分蛋白的相对分子质量为l1 300~12 500。北京协和医院变态反应科李宏

      

 

笔者于2005年报告了首例花椒引起的过敏性休克⋯。现对近年来收集的l5例花椒严重过敏反应病例的临床特点进行总结,并对花椒致敏组分进行分析。以助于变态反应科医生对此少见食物过敏性疾病的深入了解和认识,减少临床漏诊率,提高诊断准确性.及时预防和治疗可能发生的严重过敏反应。

对象和方法对象:l5例花椒过敏患者均为北京协和医院变态反应科门诊病例,其中男6例、女9例,就诊年龄28~59岁.食物过敏病程1至 17年不等。食物过敏诊断参考Middleton’S Allergy 的诊断标准, 主要基于四方面综和判断:(1)经过反复详细全面的病史询问和记录,临床表现具有典型速发型食物过敏特点,发生过明确花椒诱发的食物过敏反应2次或2次以上;(2)根据病史、症状、体征以及皮肤试验结果的提示,选择特异性IgE检测项目。对于曾经发生过敏性休克或患有其他疾病或其他不适合变应原皮肤点刺试验的患者直接进行血清特异性IgE检测。血清特异性IgE检测采用Immuno CAP系统,该检测系统每月参加全球实验室室间质控;(3)皮肤试验采用点刺试验.如遇患者对某种食物高度过敏(如食后出现哮喘、喉水肿、晕厥或休克),则不做点刺试验,直接进行体外试验,结果判定依据文献[3];(4)由于食物变应原激发试验对医患双方均存在极大的风险。且对于实施食物激发试验所要求的条件很高,因此本研究未做花椒变应原激发试验。

方法:采用统一问卷,收集所有病例的临床资料。检测血清花椒特异性IgE花椒籽和花椒皮。花椒原料:花椒从市场上购得。外皮呈酱红色,椒粒大而均匀,籽黑亮且饱满,具有浓郁的辛香味,不属于陈年花椒,材料新鲜可用。将购得的花椒进行人工皮籽分离。

花椒皮和花椒籽变应原提取:取粉碎后的花椒

皮和花椒籽用丙酮进行脱脂处理,直到脱脂液澄清为止.弃去丙酮并待残余丙酮挥发尽后获得干燥无味的花椒皮和籽末。分别将花椒皮和花椒籽以1:10(w/v)的比例加入PBS缓冲液(pH 8.O,0.02 mol/L)进行变应原的浸出,提取时间48小时,每日于常温下至少搅拌2小时,其余时间置4℃继续浸出。将获得的变应原浸出上清进行蛋白浓缩处理后用Bradford法测定溶液蛋白浓度。

花椒皮和花椒籽点刺液制备:将花椒皮和花椒籽分别粉碎后,均按1:2(w/v)比例加入变应原溶媒,震荡混合,4℃继续浸出2小时后,取上清行点刺试验。同时设组胺阳性对照和变应原溶媒阴性对照。结果判定:风团平均直径大于阳性对照为4+,风团平均直径等于阳性对照为3+,风团平均直径为阳性对照2/3为2+,风团平均直径为阳性对照1/3为+。由于花椒有刺激性辛麻味,为观察其是否会对皮肤产生刺激性假阳性反应,特设3例患者的花椒不过敏亲友为健康对照。花椒皮和花椒籽蛋白成分分析:采用SDS—PAGE法;(1)电泳基本参数设置:胶浓度:分离胶浓度l5% ,浓缩胶浓度4%;f21恒压电参数设置:分离胶200V,浓缩胶80V;(3)样品处理:用2×样品缓冲液等体积稀释样品溶液,在100oC水浴中煮5分钟后经10 000 g、5分钟(4℃)离心处理,备上样。样品上样量为每个泳道30 l,同时做低相对分子质量蛋白标准品对照;f4)凝胶染色:电泳结束后,对凝胶进行银染。电泳所涉及的所有缓冲液或试剂的配制以及操作均根据Laemmli法进行。

统计学处理

花椒皮和花椒籽特异性IgE采用成对双样本均值t检验,P<0.05表示差异有显著性意义。

结 果

15例花椒过敏患者均表现为速发型食物过敏反应.过敏反应均发生于进食过敏食物后30分钟内,其中12例为lO分钟内反应.3例即刻发生反应。诱发过敏食物量为一口或数13食物。l4例诊断为严重过敏反应,其中5例曾发生过敏性休克(伴有意识丧失2例),1例诊断为急性荨麻疹。15例花椒过敏患者的临床表现为13咽黏膜痒、肿、刺痛,舌麻木感、肿大(14例),耳痒,打喷嚏、眼痒;唇面部肿胀,全身皮肤瘙痒、红斑、风团(13例);食道、胃部灼痛,腹部绞痛、呕吐、腹泻(11例);喉水肿、哮喘急性发作、呼吸困难(11例);心悸,晕厥,休克等。14例患者起始症状为13咽部过敏反应。每例患者均曾急诊2~4次。15例花椒过敏患者中8例有过敏性鼻炎史、6例有支气管哮喘史、1例有狗过敏史、1例有药物过敏史、1例有染发剂过敏史,所有患者均无特应性皮炎史。本组病例均伴有多种食物,如腰果、开心果、橘子、金桔、芝麻、杏仁、榛子、松子、芒果等过敏(表1),都存在腰果和/或开心果过敏,但均无进食花生、黄豆过敏。13例花椒过敏患者中,花椒籽特异性IgE除1例为2级外,其余12例均为强阳性(≥3级);花椒皮特异性IgE,2例为2级,11例为0级。花椒皮和花椒籽特异性IgE结果经成对双样本均值t检验有显著性差异(P<0.00014)(表1)。10例点刺试验花椒籽均为强阳性,2例3+.8例4+;花椒皮1例2+,2例+,7例一(表1)。3例健康对照者花椒皮和花椒籽点刺试验均为阴性。Bradford法测定花椒皮蛋白浓度为1.0 rag/m1,花椒籽蛋白浓度为4.8 mg/ml。花椒皮和花椒籽变应原浸液SDS—PAGE及免疫印迹结果见图1。2。免疫印迹结果经扫描仪PowerLook 2100XL (UMAX)扫描后.用ImageQuant TL软件进行分析得到以下结果(表2)。讨 论花椒属于芸香科(Rutaceae)花椒属fZanthoxylumLinn.1.英文名为pricklyash peel、sichuan pepper、szeehuan pepper,拉丁名为pericarpium zanthoxyli,因其味麻。又称作麻椒。本组花椒引起严重过敏反应患者共15例,男:女为6:9,女性发病高于男性,就诊年龄28—59岁,食物过敏病程1 17年不等。花椒致敏性极强,少量摄人就可能引起严重过敏反应。本组14例诊断为严重过敏反应,其中5例发生过过敏性休克(伴有意识丧失2例),1例诊断为急性荨麻疹。患者临床可表现为口咽黏膜痒、麻、肿、刺痛,舌麻木感、肿大,耳痒,打喷嚏、眼痒;唇面部肿胀,全身皮肤瘙痒、红斑、风团;食道、胃部灼痛,腹部绞痛、呕吐、腹泻;喉水肿、哮喘急性发作、呼吸困难;心悸,晕厥,休克等。本组15例患者均有2次或2次以上因花椒过敏就诊史,每次发病症状经1天至l周好转,需特别注意的是3例患者有明确的速发型食物过敏反应的迟发相表现。表明对于此类严重过敏反应患者应密切观察24~48小时,以便根据病情变化予以及时处置,避免病情反复加重,造成生命危险。因临床表现不同,患者急诊的科室有皮肤科、耳鼻喉科、内科(呼吸科、消化科)、神经内科等;多数患者因病情反复加重而于本院变态反应科就诊,最终明确诊断。15例患者中14例严重过敏反应患者的起始症状均为口咽部过敏反应.表现为口咽部黏膜刺痒、刺痛。提示对有口咽过敏反应症状的患者应给与高度重视.因为这种前驱症状有可能继续发展为致命性严重过敏反应,如呼吸困难、休克、意识丧失甚至死亡。通常认为皮肤点刺试验是较为安全的,但是对某些高度过敏的患者仍可能诱发全身过敏反应。本组10例花椒过敏患者在点刺试验中2例出现局部皮肤反应以外的全身反应,1例为呼吸道症状,另1例为消化道症状,经密切观察处理后24小时内好转。提示.即使是点刺试验也应在置备好各项安全应急措施下方可进行。3例健康对照者花椒皮和花椒籽点刺试验均为阴性。初步表明花椒籽和花椒皮对皮肤的刺激性均很小,不会造成点刺试验假阳性。13例花椒过敏患者花椒籽特异性IgE除1例为2级外,其余均为强阳性(≥3级);花椒皮特异性IgE,2例为2级,11例为0级。花椒皮和花椒籽特异性IgE结果经成对双样本均值t检验分析有显著性差异(P<0.00014)。花椒籽血清特应性IgE强阳性与临床过敏反应症状有较好的一致性。

花椒是中国人最常用的调味品之一,经常隐含在各种菜肴、点心、小吃中,不易被发现。一般说来,IgE介导的食物过敏潜伏期短.容易发现速发型过敏反应。但要从某些混合食物中寻找真正的变应原,并不容易。本研究通过病史线索、花椒皮和花椒籽皮肤点刺试验、特应性IgE检测、蛋白电泳、免疫印迹结果综合分析发现,花椒变应原主要来自花椒籽.而不是花椒皮,并且花椒籽的蛋白含量明显高于花椒皮。根据我国有关食品规定,市售花椒中花椒籽含量不应超过2%,即人们食用花椒皮的几率远大于花椒籽。花椒过敏患者有时接触花椒并无过敏反应。这可能是因为其所食用的花椒中并不存在花椒籽,或是因为在食品加工过程中花椒籽致敏性已减低消失。经常诱发花椒过敏的食品有含花椒的点心,椒盐食品(椒盐排骨、椒盐虾等),麻辣食品,怪味豆,锅巴,五香粉,炒菜中的花椒等。食物过敏是引起全身严重过敏反应最常见的病因之一。严重过敏反应有时具有致命性,因其能导致喉水肿、急性哮喘发作、呼吸困难、过敏性休克等。美国每年因食物过敏死亡的病例约100例。最近一篇对美国32例因食物过敏死亡病例的分析指出.其中94%的死亡病例由花生或坚果过敏所致⋯。然而在我国,花生过敏并不常见,而且花生造成的严重过敏反应也不常见l5]。与花生相反,坚果在国内诱发的严重过敏反应或过敏性休克比较常见。李宏等[6-7]曾报告了30例腰果过敏患者,其中6例发生了过敏性休克。本组花椒过敏病例均表现为多种食物过敏,除花椒外,均合并有腰果和/或开心果过敏。另外还有8例合并橘和/或金橘过敏。腰果与开心果同属漆树科,两者间存在交叉过敏反应现象[8-1o].但花椒与腰果、开心果是否也存在交叉过敏反应尚无报告,有待进一步证实。花椒与橘、金橘同属芸香科,很可能存在交叉过敏反应.但亦需进一步试验证实。此外,本组病例中。部分存在其他过敏性疾病史,如过敏性鼻炎和哮喘等。

综上.进食少量花椒即可能诱发严重的过敏反应,甚至过敏性休克。花椒过敏反应是由IgE介导的速发型食物过敏反应,部分患者可表现为速发相和迟发相双相反应。花椒变应原来自花椒籽,而不是花椒皮。对花椒高度敏感个体,花椒点刺试验有可能诱发全身过敏反应。目前检测到的花椒籽变应原致敏组分蛋白的相对分子质量为l1 300~12 500。

 

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发表于:2010-08-23 14:39

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