乙肝阳转阴的意义——《专家谈乙肝阳转阴》

通常意义上的

乙肝阳转阴是指乙肝病毒表面抗原（HBsAg）、乙肝病毒e抗原（HBeAg）、乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）的转阴。

一、乙肝病毒表面抗原（HBsAg）

HBsAg阳性，提示急性感染或慢性感染，病毒携带者。

HBsAg是乙型肝炎患者最基本、最常用的的检测，可以用反向被动血凝技术、酶联免疫吸附检测（ELLSA）、被动血凝技术（RIA）中的任何方法检测，但前者简单方便，还可以进行滴度定量检测，基层常用。ELLSA法比前者灵敏，为最常用的方法。从未感染乙肝病毒的人，其HBsAg为阴性。HBsAg阳性为乙肝病毒感染的指标，是否发病或有过发病史还要参考其他指标。根据HBsAg的滴度可以推断感染者的传染性，一般滴度越高，其HBeAg（乙肝病毒e抗原）、HBV-DNA阳性的可能性也越大，其传染性也越强。有时不能仅根据HBsAg的单项确定肝炎的诊断。HBsAg阴性的病毒性肝炎，仍可能是乙型肝炎。

一般认为，HBsAg在感染病毒后2-6个月出现，相当于临床潜伏期，丙氨酸氨基转移酶（ALT）升高前2-8周，出现于肝细胞浆，血液及其他体液（胆汁、唾液、乳汁、汗液、精液、阴道分泌物等）中，急性自限性肝炎6个月即可消失，慢性肝炎或病毒携带者可持续存在。HBsAg是病毒的外壳物质（表面蛋白），并不是完整的病毒颗粒，血清HBsAg阴性而HBV-DNA阳性可能有三种情况：一是HBsAg滴度低或正在消失，用现行的ELLSA方法测不出。二是可能为不同亚型的感染。三是S基因变异，以致血中出现有缺陷的HBsAg，用常规方法检测不出。故检测乙肝病毒感染时，只测HBsAg是不够的。

只有实现HBsAg的转阴，同时机体又产生了应该表面抗体，这样的情况才是最理想的，也是乙型肝炎达到治愈的金标准。

二、乙肝病毒e抗原（HBeAg）

HBeAg阳性，提示急性感染或慢性感染，病毒复制，有传染性。

此为乙肝病毒核心抗原（HBcAg）的讲解产物，在HBsAg阳性血清及体液中可测出。HBeAg与HBsAg的浓度，Dane颗粒、HBcAg及DNA多聚酶呈正相关，是乙肝病毒复制的指标，代表传染性。它的出现迟于HBsAg，消失早于HBsAg，急性自限性感染在血中存在的时间不超过10周；在慢性感染及病毒携带者可持续存在。

HBeAg是临床上提示病毒复制的较实用的血清标准物，一般认为，HBeAg的存在与ALT的波动和乙肝病毒的复制有关，但在不同的乙型肝炎状态时有不同的解释。在急性乙肝病毒感染时，HBeAg仅出现在感染的早期，在病变极期之后消失，持续存在提示向慢性化发展。在乙肝病毒携带者，HBeAg是免疫耐受的调节因子，在感染的较前阶段持续存在，是处于免疫耐受高感染低应答期。在慢性乙型肝炎相关肝病持续期间，HBeAg阳性提示大多伴随病变活动，HBV-DNA复制和ALT波动。但HBeAg阴性并不能完全排除乙肝病毒的感染后复制，在某些前C区变异的乙肝病毒感染情况下，由于不能编码合成HBeAg，虽然检测HBeAg阴性，但实际仍存在乙肝病毒的复制。

乙肝病毒e抗原转阴或转换只能表明或只意味着病毒得到有效抑制。

三、乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）

HBV-DNA阳性，是乙肝病毒感染、复制和病情活动的直接指标，较其它乙肝病毒标志更具有诊断价值，代表病毒的复制及复制的强弱。

HBV-DNA位于乙肝病毒核心内，为双链，是一条完整的长链，另一条短链经乙肝病毒脱氧核糖核酸多聚酶（DNAP）修补后可以延长15-45%，蛋白编码均在长链中，血清中HBV-DNA的检测目前共有3种方法。

1.斑点杂交法

用32P-HBV-DNA探针，将血清标本滴在硝酸纤维膜上，通过碱处理，使双股DNA变成单股。然后将探针加热处理后迅速冷却，使这也变成单股，与有标本的硝酸纤维膜同置于一定温度下进行杂交，如果纤维膜上的标本内有HBV-DNA则碱基相应配对而与探针的HBV-DNA结合，使硝酸纤维膜上有标本的部分带有同位素。做放射自显影，有HBV-DNA部位即显示黑色斑点。此法简单，用血量小，灵敏度高，可测出1pg水平HBV-DNA，但此法有时出现假阳性，而且使用放射性物质为其缺点。

2.吸印法

用于测定HBV-DNA在标本中的整合状态。将克隆的HBV-DNA全基因或用内切酶分离出不同的基因片段，分布标记或做成探针。标本经琼脂电泳后转移至醋酸纤维膜上，与上述标记的的探针进行杂交及及放射自显影。根据杂交后出现区带分子量的不同，了解标本中HBV-DNA的状态。

3.聚合酶链反应（PCR）或称体外酶扩增DNA

其原理类似天然DNA的复制机制。该法是试管内特异性DNA在引物的作用下的聚合酶反应，使DNA特异片段不断增值。PCR可检出10-18水平（1-10fg）的HBV-DNA，比斑点杂交法的灵敏度至少高100倍。国内有报道36例HBsAg阴性的慢肝患者，用PCR法检测血清，结果24例HBV-DNA（67%），HBV标志物全阴性的15例中检出9例HBV-DNA阳性。提示PCR法灵敏度极高。